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      熒光分光光度計測試的注意事項有哪些
      
            
      
              發(fā)布日期：
              2020-05-25
            
      
            
      
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      　　熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器
        ，有濾光片熒光計
        、濾光片-單色器熒光計等，通常均由以下四個部分組成：激發(fā)光源
        、用于選擇激發(fā)光波長和熒光波長的單色器
        、樣品池及測量熒光的檢測器。熒光強(qiáng)度容易受外界因素的影響
        ，如樣品池
        、激發(fā)光源
        、溫度、溶液的pH值
        、溶劑性質(zhì)
        、其它溶質(zhì)、表面活性劑等都會造成熒光強(qiáng)度的變化
        。嚴(yán)格控制測試條件對熒光分析來說至關(guān)重要
        。
      　　①樣品應(yīng)盛在四面透光的石英比色皿（熒光池）中
        ，如果是揮發(fā)性樣品應(yīng)使用帶塞的熒光池
        。
      　　②在熒光分析時
        ，為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)
      ，一般需要開機(jī)預(yù)熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈
      ，預(yù)熱時間可以縮短到10min左右。對某些易感光
      、易分解的熒光物質(zhì)
      ，盡量采用長波長、低人射光強(qiáng)度及短時間光照
      。
      　?div   id="jpandex"   class="focus-wrap mb20 cf">、蹨囟茸兓梢馃晒鈴?qiáng)度的改變。通常降低溫度
      ，有利于提高熒光量子產(chǎn)率
      ，熒光強(qiáng)度增大。溫度影響熒光強(qiáng)度的顯著程度因樣品而異
      ，大部分熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度受溫度影響不大
      ，測試溫度變化不超過±3℃，對測試結(jié)果幾乎無影響
      。
      　?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      、墚?dāng)熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時，溶液的pH對熒光強(qiáng)度有較大影響
      。因為弱酸或弱堿在不同酸度中
      ，分子和離子的電離平衡會發(fā)生改變，而熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度會因其離解狀態(tài)發(fā)生改變
      。以苯胺為例：在pH=7～12的溶液中會產(chǎn)生藍(lán)色熒光
      ，在pH<2或ph>13的溶液中都不產(chǎn)生熒光。再如
      ，維生素B2（核黃素）在430～440nm藍(lán)光照射下會發(fā)出綠色熒光
      ，λem為535nm
      。它在pH=6～7的溶液中熒光強(qiáng)度大，而在pH=11時熒光消失
        ；但在堿性溶液經(jīng)光線照射發(fā)生分解作用或在酸性KMn04氧化下都會生成熒光強(qiáng)度比維生素B2強(qiáng)得多的黃光素
        ，并可溶于lv仿。利用此性質(zhì)可提高測定的靈敏度和選擇性
        。
      　?div   id="m50uktp"   class="box-center">  、莘肿咏Y(jié)構(gòu)中存在π-π共軛的熒光物質(zhì)在極性溶劑中，熒光效率顯著增強(qiáng)
        。溶液中表面活性劑的加入能夠顯著提高熒光強(qiáng)度
        。
      　　⑥瑞利散射和拉曼散射是溶劑的兩種散射光
        ，應(yīng)注意不要誤把瑞利散射和拉曼散射光譜當(dāng)做熒光光譜
        。瑞利散射光波長與激發(fā)光波長相同，拉曼散射與激發(fā)光波長不同
        ，而熒光物質(zhì)的熒光波長與激發(fā)光波長無關(guān)
        ，因此可以通過選擇適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)波長將拉曼散射光與熒光分開。在測試時選擇合適的狹縫寬度
        ，或者空白扣除
        ，也可以對散射光的影響進(jìn)行校正。
      　?div   id="m50uktp"   class="box-center">  、邿晒馕镔|(zhì)分子與溶液中其它物質(zhì)分子之間作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低
      ，常見的熒光猝滅劑，如鹵素離子
      、重金屬離子
      、硝基化物質(zhì)、重氮化合物等
      。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質(zhì)產(chǎn)生不同程度的熒光熄滅現(xiàn)象
      ，因此，在較嚴(yán)格的熒光實驗中必須除02
      。
      　?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      、鄿y試過程中注意不要肉眼盯著氙燈光源看，以防對眼睛造成損傷
      。
      　?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      、醿x器房應(yīng)注意經(jīng)常通風(fēng)，避免產(chǎn)生的臭氧在室內(nèi)富集
      。
      
            
      
          
      
          
      
            
      
            
            
      
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