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熒光分光光度計測試的注意事項有哪些

發(fā)布日期： 2020-03-19
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　　熒光強度容易受外界因素的影響
，如樣品池、激發(fā)光源
、溫度
、溶液的pH值、溶劑性質、其它溶質
、表面活性劑等都會造成熒光強度的變化
。嚴格控制測試條件對熒光分析來說至關重要。
　　熒光分光光度計測試的注意事項有哪些：
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、贅悠窇⒃谒拿嫱腹獾氖⒈壬螅晒獬兀┲?div id="d48novz" class="flower left">
，如果是揮發(fā)性樣品應使用帶塞的熒光池。
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、谠跓晒夥治鰰r
，為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)，一般需要開機預熱氙燈大約30min
。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈
，預熱時間可以縮短到10min左右。對某些易感光
、易分解的熒光物質
，盡量采用長波長、低人射光強度及短時間光照
。
　?div id="jfovm50" class="index-wrap">、蹨囟茸兓梢馃晒鈴姸鹊母淖儭Ｍǔ＝档蜏囟?div id="jfovm50" class="index-wrap">，有利于提高熒光量子產(chǎn)率
，熒光強度增大。溫度影響熒光強度的顯著程度因樣品而異
，大部分熒光物質的熒光強度受溫度影響不大
，測試溫度變化不超過±3℃，對測試結果幾乎無影響
。
　?div id="jfovm50" class="index-wrap">、墚敓晒馕镔|是弱酸或弱堿時，溶液的pH對熒光強度有較大影響
。因為弱酸或弱堿在不同酸度中
，分子和離子的電離平衡會發(fā)生改變，而熒光物質的熒光強度會因其離解狀態(tài)發(fā)生改變
。以苯胺為例：在pH=7～12的溶液中會產(chǎn)生藍色熒光
，在pH<2或ph>13的溶液中都不產(chǎn)生熒光。再如
，維生素B2（核黃素）在430～440nm藍光照射下會發(fā)出綠色熒光
，λem為535nm。它在pH=6～7的溶液中熒光強度大
，而在pH=11時熒光消失
；但在堿性溶液經(jīng)光線照射發(fā)生分解作用或在酸性KMn04氧化下都會生成熒光強度比維生素B2強得多的黃光素
，并可溶于。利用此性質可提高測定的靈敏度和選擇性
。
　?div id="jfovm50" class="index-wrap">、莘肿咏Y構中存在π-π共軛的熒光物質在極性溶劑中，熒光效率顯著增強
。溶液中表面活性劑的加入能夠顯著提高熒光強度
。
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